播州赤穂城主浅野内匠頭（北上弥太郎）は、高家筆頭吉良上野介（石黒達也）から受けた恥辱に耐えかねて殿中刃傷に及んだが、加古川本蔵（坂東蓑助〔八代目坂東三津五郎〕）にさえぎられて吉良を打ち損じた。お家断絶、内匠頭は切腹。家老大石内蔵助（市川猿之助〔初代市川猿翁〕）は、無事に城を明渡し、家臣を離散させた。だが、その胸中には、主君の無念を晴らすべく、固い誓いが数十人の連状と共に秘められているのだった…。

元禄14年3月。年々の慣例として勅使饗応の役を申し渡された播州赤穂の城主・浅野内匠頭（加山雄三）は指南役の吉良上野介（市川中車）から礼儀作法について教えを乞うこととなっていた。だがかつて内匠頭に塩田作法の教授を拒否された上野介は、彼に恨みを抱いており、その嫌がらせは日に日に増していった。お役目の大事を重んじる内匠頭ははやる心を抑え、悔しさに堪えたが、ついに殿中松の廊下に於いて、上野介に剣を振り下ろした。内匠頭は即刻切腹を言い渡されるが、上野介には何の咎めもなかった。そして赤穂城内では、城代家老・大石内蔵助（八代目・松本幸四郎《松本白鸚》）を中心に、城とともに討ち死にするか、城を明け渡して浅野家再興に尽くすか、議論が繰り広げられていた。大石は急進派の意見を押さえ、いささかの波乱も見せずに城を明け渡す断を下した。そして集まった60余名が誓紙血判をもってこれに従うが……。